高壓蒸氣滅菌器使物品滅菌后達(dá)到無菌要求，這是藥品實驗的基本保證。高壓滅菌器滅菌效果是否合格是實驗成敗的基礎(chǔ)最關(guān)鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解，不需高壓滅菌外，大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓滅菌15-30分鐘。尤其是對無菌試驗培養(yǎng)基滅菌不成功，直接關(guān)系到對藥品的無菌試驗結(jié)果。因此必須認(rèn)真對高壓滅菌器進行滅菌效果的驗證。為此我們提供了進行滅菌效果驗證的一個簡易可行的方法。

高壓蒸汽滅菌鍋驗證-消毒滅菌效果驗證  試驗材料

生物指示劑：菌片和培養(yǎng)基混合指示管采用嗜熱脂肪桿菌芽孢（ATCC 7953常用的生物指示菌）和溴甲酚紫蛋白胨恢復(fù)培養(yǎng)基組成，根據(jù)培養(yǎng)后的顏色變化來判斷壓力蒸汽滅菌是否合格。本品芽孢含量為5.0×10^5cfu/支～5.0×10^6cfu/支，121℃壓力蒸汽滅菌死亡時間不超過19分鐘，存活時間不少于3.9分鐘。

適用于121℃下排氣壓力蒸汽和132℃預(yù)真空壓力蒸汽滅菌效果測試。

檢測方法

1 在壓力蒸汽滅菌生物指示劑表面的標(biāo)簽空白處，記錄滅菌管理的必要事項（如：滅菌處理日期、操作人員等）

2 將壓力蒸汽滅菌生物指示劑置于標(biāo)準(zhǔn)試驗包（23cmX23cmX15cm）的中心部分，然后將標(biāo)準(zhǔn)測試包置于滅菌器排氣口的上方或生產(chǎn)廠家建議的滅菌器內(nèi)Γ難滅菌的位置，運行滅菌程序。

3 滅菌處理后，將標(biāo)準(zhǔn)測試包中的生物指示劑取出，確認(rèn)標(biāo)簽上的化學(xué)指示油墨由黃色變成黑色后，放置15min以上冷卻至室溫。

4 用夾子將冷卻后的壓力蒸汽滅菌生物指示劑內(nèi)部的安瓿瓶夾破，使菌片充分接觸培養(yǎng)基，確認(rèn)菌片浸于培養(yǎng)基后及時培養(yǎng)。

5 請在56~58℃進行培養(yǎng)。另取一支同一批次未滅菌的壓力蒸汽滅菌生物指示劑，在夾破安瓿瓶后，同條件下進行培養(yǎng)作為陽性對照。

6 確認(rèn)滅菌效果后，請將標(biāo)簽取下粘貼在記錄簿留存。

【結(jié)果判定】

1、若恢復(fù)培養(yǎng)48H后，恢復(fù)培養(yǎng)基由紫紅色變成黃色，表示滅菌不合格。

2、若恢復(fù)培養(yǎng)48h后，恢復(fù)培養(yǎng)基的顏色保持紫紅色不變，則判斷滅菌合格。

3、以上兩種結(jié)果只有在對照管（培養(yǎng)不超過24小時）為陽性時其生物監(jiān)測結(jié)果才算有效。